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在室温中植物ELISA检测试剂盒操作的流程事项

2017-06-21      点击:291
   在室温中植物ELISA检测试剂盒操作的流程事项
  
  植物ELISA检测试剂盒操作步骤
  
  各试剂在使用前平衡至室温。
  
  1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外,余孔分别加标准溶液或待测样品100ul,注意不要有气泡,轻轻混匀,酶标板加上盖,37℃反应120分钟。
  
  2.弃去液体,甩干,不用洗涤。
  
  3.每孔加检测溶液A工作液100ul,37℃,60分钟。洗板3次,350ul/每孔,甩干。
  
  4.每孔加检测溶液B工作液100ul,37℃,60分钟,洗板5次,甩干。
  
  5.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显)。
  
  6.依序每孔加终止溶液50ul,终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
  
  植物ELISA检测试剂盒注意事项:
  
  1.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
  
  2.一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  
  3.请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。
  
  4.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数。
  
  5.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
  
  6.底物请避光保存。
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