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ANG-2,血管生成素2检测方法(人ELISA)

2019-04-16      162

人血管生成素2ANG-2)ELISA试剂盒

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人血管生成素2(ANG-2)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人血管生成素2(ANG-2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

试剂盒性能

  •  检测范围:0.75 ng/mL – 24 ng/mL。
  •  灵敏度:最低检测浓度小于0.1 ng/mL。
  •  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
  •  重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。

操作步骤

注意事项

  • 严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
  • 洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
  • 消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
  • 底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
  • 避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
  • 在储存和温育时避免强光直接照射。
  • 平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
  • 任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
  • 不能使用过期产品。
  • 如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。

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